三明治型ELISA測試法需要兩種相異的抗原決定位,且兩抗原決定位須具一定距離,但是三明治型ELISA測試法卻不適用於像硫酸吲哚酚(Indoxyl sulfate,IS)這類的小分子,因為它們相異的抗原決定位數量有限,且無法同時被兩種不同的抗體捕獲,所以並不適合用三明治型ELISA測試法去檢測IS的存在。因此,偉喬生醫全程自主研發生產的體外檢測試劑LEADGENE® IS ELISA Kit (CAT:00201)則採用競爭型ELISA測試法,去取代常用的三明治型ELISA測試法,以檢測IS的存在。
由偉喬生醫生產的IS單株抗體 ELISA Kit所測得的IS濃度標準曲線(圖1)是藉由與不同濃度的已知樣品之結合百分比(B/B0)去繪製建構而成。而此標準曲線可用於量化未知樣品中IS的濃度。
圖1. 偉喬生醫生產的IS單株抗體ELISA 其標準曲線
左旋色胺酸,3-吲哚乙酸(L-Tryptophan,3-Indoleacetic acid)和吲哚(Indole)都是與IS具相似的分子結構的小分子,其原因為三者都屬於吡咯(pyrrole)家族衍生物的一員。因此,左旋色胺酸,3-吲哚乙酸和吲哚可藉由與專一性低的檢測抗體結合並產生偽陽性的結果。再加上這些分子因為參與了IS合成的上或下游途徑,所以通常也都存在於血清樣品中,並進一步增加其非專一性結合的機會。
由圖二可證明說,即使加入了相似的分子(左旋色胺酸,3-吲哚乙酸和吲哚),它們也不會與IS抗原競爭我們所研發生產的IS單株抗體辨認位置,這表明我們所研發生產的IS單株抗體具有高度的專一性。而這也將藉由我們的IS單株抗體不會辨認非專一性分子之特性去預防偽陽性結果的產生。